鸡传染性喉气管炎（Infectious Laryngotracheitis, ILT）是由疱疹病毒科α疱疹病毒属的鸡传染性喉气管炎病毒（ILTV）引起的高度接触性呼吸道传染病。该病以呼吸困难、咳嗽、咳血、产蛋量下降及高死亡率为主要特征，对养禽业造成重大经济损失。由于ILTV可通过空气、污染物及带毒鸡快速传播，早期诊断和精准检测是防控疫情扩散的关键环节。通过科学规范的检测手段，能够及时识别感染个体，制定隔离、免疫或扑杀措施，从而有效控制病毒传播链。
针对鸡传染性喉气管炎的检测主要包括以下几类项目：
1. 病毒分离与鉴定：通过采集病鸡的气管渗出物、肺组织或结痂样本，接种鸡胚或细胞培养系统（如鸡胚肝细胞）进行病毒分离，结合典型细胞病变效应（CPE）和电镜观察确认病毒存在。
2. 血清学检测：检测鸡群血清中的特异性抗体，包括酶联免疫吸附试验（ELISA）、病毒中和试验（VNT）及琼脂扩散试验（AGP）。
3. 分子生物学检测：基于PCR技术（如常规PCR、实时荧光定量PCR）扩增病毒DNA，靶基因常选择病毒gB、ICP4等保守区域。
4. 病理组织学检查：观察气管黏膜充血、出血、坏死及细胞内嗜酸性包涵体等特征性病变。
1. 病毒分离法：将处理后的样本接种9-12日龄鸡胚绒毛尿囊膜，观察3-5天内是否出现痘斑样病变。该方法灵敏度高，但耗时较长（需5-7天）。
2. ELISA检测：利用重组病毒蛋白（如gB蛋白）包被反应板，通过酶标二抗显色定量分析抗体水平，适用于大规模筛查，24小时内可出结果。
3. 实时荧光定量PCR：针对ILTV的TK基因或gB基因设计特异性引物，可检测低至10拷贝/μL的病毒核酸，4小时内完成检测，兼具高灵敏度和特异性。
4. 免疫组化技术：通过特异性单克隆抗体标记感染组织中的病毒抗原，适用于病理样本的病原定位分析。
我国及国际权威机构制定的检测标准包括：
1. OIE标准：世界动物卫生组织推荐采用病毒分离结合PCR验证作为确诊依据，血清学检测需满足病毒中和试验抗体效价≥1:16。
2. GB/T 36875-2018：中国国家标准规定，实时荧光PCR检测的Ct值≤35且出现特异性扩增曲线判定为阳性，需同时设立阴性对照和阳性对照。
3. NY/T 551-2015：农业行业标准要求病毒分离试验中，鸡胚接种后出现典型痘斑且PCR复核阳性方可确认结果。
4. 临床判定标准：结合流行病学特征（如急性发病、高死亡率）、典型临床症状（咳血、喘鸣）及实验室检测结果进行综合诊断。
在实际应用中，建议采用“初筛（ELISA/快速PCR）+复核（病毒分离/测序）”的联合策略，以确保检测结果的准确性。同时，需注意疫苗毒株（如CEO疫苗）与野毒株的鉴别检测，避免误判。
